噬菌体感染后会形成噬斑。什么是基因突变?实验表明,这种λ(K)噬菌体感染大肠杆菌B株时,形成空斑的效率很低,所以我们说λ(K)噬菌体受B菌限制,1.插入型噬菌体载体和替代型噬菌体载体有什么区别?没有感染斑块,呵呵,双琼脂平板纯化法,细菌会在固体琼脂层上生长,形成噬菌斑,通过选择单个噬菌斑进行进一步培养和分离,可以获得单个细菌克隆。
双琼脂平板纯化法可用于分离单个细菌克隆,但不一定能获得形态特征一致的单个噬菌斑,这取决于细菌的特性和实验操作的技巧。双琼脂平板纯化法,细菌会在固体琼脂层上生长,形成噬菌斑。通过选择单个噬菌斑进行进一步培养和分离,可以获得单个细菌克隆。但如果琼脂层上的菌落分布不均匀,或者细菌本身具有多态性或变异性,就可能出现不同形状或大小的斑块。
(1)λ噬菌体克隆载体:λ噬菌体由DNA(λDNA)和外壳蛋白组成,对大肠杆菌有很高的感染性。λDNA在噬菌体中以线性双链DNA分子存在,全长48502bp。左右两端有由12个核苷酸组成的5′粘性末端,它们的核苷酸序列是互补的。进入宿主细胞后,粘性末端连接形成环状DNA分子。这一端叫做emphasis:role italic cosphasis site(内聚:end: site)。
构建λ噬菌体克隆载体的策略是:(1)用合适的限制性内切酶切掉λDNA上部分或全部不需要的区域,并相应地保留该酶的一个或两个识别位点作为克隆位点,用点突变或甲基化酶处理使该酶在必要区域的识别序列失效,以避免外源DNA片段插入到必要区域;②如果需要,可以在不需要的区域插入选择标记基因;③构建的λDNA载体应不小于36.4kb
主机控制的限制和修改现象,简称R/M系统。细菌的R/M系统类似于免疫系统。它能区分自身DNA和外来DNA,并降解后者。在大肠杆菌菌株K上生长的λ噬菌体表示为λ(K)。实验表明,这种λ(K)噬菌体感染大肠杆菌B株时,形成空斑的效率很低,所以我们说λ(K)噬菌体受B菌限制。
当这些改变的λ(B)噬菌体再次感染菌株B时,它们可以有效地在菌株B上生长。第二宿主菌株(大肠杆菌B菌株)赋予λ噬菌体这种非遗传性,使其在再次感染时可以有效生长而不再受到限制的现象称为修饰。限制和修饰都是由宿主控制的,我们统称为宿主控制的限制和修饰现象。宿主控制的限制和修饰是由两种酶的活性协同完成的,一种叫做修饰甲基转移酶,另一种叫做核酸内切酶。
估计是培养基中抗生素加错了或者浓度太高了~ ~。药片上的抗生素是错的。具体问题具体分析,别人很难对微生物下结论。我只能列举几种可能:1。白色和黄色的那层应该是你需要的菌落,但是菌落太多就变成了一个菌苔。可以做个涂片镜检。毕竟你的摇瓶已经摇了19个小时了,已经到了稳定期的后期。细菌的数量大约是十的十次方。如果你的目标是获得单菌落,你应该用10倍的梯度稀释你的摇瓶种子溶液,用负七、负八和负九十三的稀释度涂抹,获得单菌落。
噬菌体感染后会形成噬斑。没有感染斑块,呵呵。如果是这种情况,白黄层可能是大肠杆菌的片段,也可以通过涂片镜检确定。如果感染了噬菌体,显微镜检查可以看到一大片云状的蓝紫色,但很少看到形成的细胞。噬菌体相当于人类的癌症。我觉得你没那么倒霉,做实验的时候刚好碰到噬菌体。3.如果你确定抗生素没用,也不会太久,因为浓度太高。毕竟不会太高。
由于某些原因,生物体内DNA链上碱基的缺失、取代或插入,改变了基因内原有的碱基排列顺序(基因型改变),表型突然发生遗传性改变。当后代突然表现出与父母明显不同的可遗传表型时,这种变异称为基因突变。根据突变过程是否受到人工诱变剂的影响,可分为自发突变和诱导突变。任何由外界环境的自然作用,如辐射或微生物的生理生化变化引起的基因突变,在没有特殊诱变条件的情况下,称为自发突变。
将外源DNA克隆到插入的λ载体分子中,会使噬菌体的某些生物学功能失去效力,称为插入失活效应。插入λ载体可分为两种亚型:对免疫功能的失活和大肠杆菌β半乳糖苷酶。具有灭活免疫功能的插入载体:这类插入载体的基因组中有一个免疫区,有一个或两个核酸内切酶的单一切割位点。
因此,任何有外源DNA插入的λ重组体都只能形成清晰的空斑,而没有外源DNA插入的亲本噬菌体则会形成浑浊的空斑。β-半乳糖苷酶失活的插入载体:它们的基因组含有大肠杆菌的lac5片段,编码β-半乳糖苷酶基因lacZ,被该载体感染的大肠杆菌的Lac指示菌在添加了IPTG和Xgal的培养基平板上涂布时会形成蓝色噬斑。